更新時間：2024-09-26
腺病毒包裝（Adenovirus，Ad）是一種無包膜的線狀雙鏈DNA病毒，其復制不依賴于宿主細胞的分裂。有近50個血清型，大多數Ad載體都是基于血清型2和5，通過轉基因的方式取代E1和E3基因，降低病毒的復制能力。這些重組病毒僅在高水平表達E1和E3基因的細胞中復制，因此是一種適用于治療的高效控制系統。
腺病毒包裝(Adenovirus，Ad)是一種無包膜的線狀雙鏈DNA病毒，其復制不依賴于宿主細胞的分裂。有近50個血清型，大多數Ad載體都是基于血清型2和5，通過轉基因的方式取代E1和E3基因，降低病毒的復制能力。這些重組病毒僅在高水平表達E1和E3基因的細胞中復制，因此是一種適用于治療的高效控制系統。
重組腺病毒（AdV）是人血清5型腺病毒（Ad5），一種復制缺陷的腺病毒載體系統，在基因治療
腺病毒包裝特點：
1）幾乎可以感染所有類型的細胞。
2）可以獲得復制缺陷型 (E1 和 E3 缺失) 的腺病毒。
3）病毒滴度高，產生病毒經過濃縮后可以達到1012 PFU/mL，能有效的進行增殖。
注：plaque forming unit/ml，空斑形成單位，感染性滴度的單位一般表示為PFU/ml。
4）腺病毒載體感染宿主的范圍比較廣，制備容易，操作簡單。
5）感染細胞時，不整合到染色體中，不存在激活致癌基因或插入突變等危險，生物安全性高。
簡要流程：
1）構建表達 siRNA/miRNA 的腺病毒載體。
2）采用 PacI 消化純化的質粒。
3）消化好的腺病毒表達載體轉染 293A 細胞，收獲細胞以制備病毒粗提液。
4）將病毒粗提液感染293A細胞以擴增病毒。
5）分裝，-80℃保存。
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