更新時間：2024-09-26
多重熒光免疫組化檢測與顯色法多重免疫組化不同，多重熒光免疫組化（mIHC）是基于酪胺信號放大（ Tyramide Signal Amplification，TSA）技術，可實現在同一組織切片樣本上對多個靶標進行區別標記，進而分析組織微環境中蘊含的復雜信息。
多重熒光免疫組化檢測（mIHC）：
主要的技術原理來自TSA技術，TSA即酪酰胺信號放大(Tyramide signal amplification)是一類利用辣根過氧化酶（HRP）對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。
多重熒光免疫組化檢測技術可與高性能染料Alexa Fluor®、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。 TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的過氧化物酶反應(酪胺鹽在HRP催化H202下形成共價鍵結合位點)，產生大量的酶促產物，該產物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基)結合，這樣在抗原-抗體結合部位就有大量的生物素沉積，與隨后加入的Streptavidin—HRP/熒光基團結合，經幾次這樣的循環放大，可以結合大量的酶分子or熒光基團，結果使其檢測信號得到幾何級放大。
多重熒光免疫組化檢測優勢：
1.高科研價值：分人、鼠兩個系列，方便在小鼠腫瘤模型和人樣品上進行平行實驗，進行轉化醫學研究；
2.高兼容性：選用熒光染料標記適用于所有配備了紫外、FITC、CY3、CY5 等波段帶熒光的顯微鏡、共聚焦顯微鏡和熒光切片掃描設備；
3.穩定性：加樣過程無需避光操作，樣品染色完4度保存半年，-20℃保存一年，熒光依然滿足拍照需求；
4.方便性：所有抗體都經過篩選，特異性好，染色濃度均經過優化，減少研究者自己摸條件的過程。
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